● 血液（末梢血）の単核細胞に発現しているNAIP が、筋萎縮性側索硬化症診断のバイオマーカーになりうる

● 筋萎縮性側索硬化症患者の運動機能低下とNAIP量の経時的な変化に関連性がみられ、進行程度を予測しうる

● 筋萎縮性側索硬化症患者で低下しているNAIP自体を治療ターゲットとした治療薬の開発が重要になる

　筋萎縮性側索硬化症（ALS）（注1）の究明は遅々としており、未だメカニズムは明らかになっていません。また、ALS治療薬の開発を目指してこれまでに多くの治験がなされてきましたが、そのことごとくが成功に至っていません。その最大の原因は、ALSの診断や進行を予測できるタンパク質や酵素などの分子指標（バイオマーカー）が見つかっていないからです。私達は、これまでに、既存のパーキンソン病用薬ブロモクリプチンが、細胞内のNeuronal Apoptosis Inhibitory Protein （NAIP：神経や細胞を酸化ストレスから保護し、機能障害や細胞死を防ぐ機能性タンパク）（注2）の発現を高め、ALS患者の症状進行を遅延させる（運動機能の保全）等の臨床研究結果を示し、NAIPが ALSの進行抑制ならびに運動神経保護に重要な役割を果たしている可能性について報告してきました。
　本論文では、NAIPの発現量がALS患者の病気の進行に関わる新発見について報告しました。
　本臨床研究では、ALS患者18名ならびに年齢適合健常者12名を対象に、末梢血の単核球（注3）で発現しているNAIPのタンパク量を定量（NAIP-Dot-Blot法）（注4）し、さらにALS患者においては、改訂ALS機能評価尺度（ALSFRS-R）スコア（注5）と努力性肺活量（注6）を運動機能評価の指標として用い、NAIP量との相関を4ヶ月毎に12ヶ月間、経時的に観察しました。これらの数値を統計解析（回帰分析）し、NAIPの量と ALSFRS-Rとの相関関係を検証しました。

　ALS患者におけるNAIP量とALSFRS-Rの12ヶ月間の経時的な観察は、6症例で評価ができました。評価開始時からの経過観察では、NAIP量が経時的に増加する患者ではALSの運動機能低下が抑制され、逆にNAIP量が不変もしくは僅かに変動する患者では顕著な運動機能低下が観察されました。

　今回の我々の結果から、NAIP量がALSの診断、予後あるいは治療効果判定のバイオマーカーになる可能性が示されました。ALSの補助診断としてNAIP量測定を行えば、早期診断や早期治療介入も可能になると考えています。また負の相関関係を示したNAIP量と経時的な運動機能変化の観察結果から、NAIPが治験薬/既存薬の効果を反映する分子指標にもなると期待されます。また、NAIP自体がALS治療薬になる可能性もあります。

（注1）筋萎縮性側索硬化症（ALS）：ALSは、脳・脊髄や末梢の運動神経が冒され、四肢、発語、嚥下や呼吸に関する筋力が急激に損なわれる原因不明の神経疾患です。発症の平均年齢は55~57歳です。予後は非常に悪く、人工呼吸器を用いなければ生存期間は2〜5年です。現在、日本国内のALS患者は9,000名を超しています。ALSの殆どは弧発性（発症の原因不明）で、約10％が家族性（責任遺伝子が同定されている）です。

（注2）NAIP： Neuronal Apoptosis Inhibitory Proteinの頭字。NAIPは、活性酸素などの酸化ストレスによって発現が誘導され、酸化ストレスが引き起こす様々な障害から細胞を保護し、神経の機能維持や生存に働く機能性タンパク質です。また、細胞や組織の炎症反応の調節にも関わっています。ヒトのNAIP遺伝子のコピー数は個人によって１コピーから数コピーと異なっています。

（注3）単核球（単核細胞）：血液中の単核食細胞とリンパ球（T細胞やB細胞等）から成る単核白血球の総称。ウイルス感染や傷害を受けた細胞、細菌、抗原物質を処理して、免疫に関わっている。

（注4）NAIP-Dot Blot法による単核球NAIPの定量：先ず、健常者とALS患者の末梢血から血球細胞を分別して、NAIPが単球やリンパ球を含む単核球でのみ発現していることをウエスタンブロット法で確認しました。其の後、便法（単核球分離用採血管）を用いて健常者とALS患者の末梢血から単核球を分離しました。単核球の全タンパク質を抽出（全細胞抽出試薬使用）し、一定タンパク質濃度に調製したサンプルをPVDF膜にブロットし、抗NAIP抗血清によるドットブロット・蛍光強度測定法でNAIP量を定量しました。その際NAIPリコンビナントタンパク質を標準物質として用いました。

（注5）改訂ALS機能評価尺度（ALSFRS-R）スコア：ALS患者の運動機能の障害の程度を表す総合評価点（国際標準スコア）。12の運動機能に関する質問項目について、各項目の評価点数（0〜4点で評価）の合計点数（48点満点）をスコアとして用います。スコアが低いほど重症で、治験の際の薬効の指標としてよく用いられます。

（注6）努力性肺活量：最大に空気を吸って（最大吸気位）から、最大限の努力で息をだした時（最大呼気位）の空気量（気量）です。